Otis, seekor sapi muda ceria, tinggal di peternakan kecil di Oedeville. Saat manusia tak melihat, semua hewan di sana hidup seperti manusia dan bebas berpesta. Otis lebih suka bersenang-senang bersama teman-temannya daripada memikirkan tanggung jawab, hal yang sering membuat Ben, ayah angkat sekaligus pemimpin peternakan, kecewa.

Suatu malam, Otis meminta Ben menggantikannya berjaga agar ia bisa menghadiri pesta besar di lumbung dan mendekati Daisy, sapi baru yang sedang hamil. Saat pesta berlangsung meriah, kawanan koyote pimpinan Dag menyerang kandang ayam. Ben datang sendirian dan berhasil mengusir mereka, tetapi mengalami luka parah. Otis yang datang terlambat hanya bisa memeluk Ben di saat-saat terakhirnya.

Setelah kematian Ben, para hewan memilih Otis sebagai pemimpin baru. Namun Otis kesulitan menjalankan tugas dan masih bersikap ceroboh. Ia bahkan sibuk balas dendam pada pengganggu bernama Snotty Boy bersama kelompok Jersey Cows, sementara tanggung jawab menjaga peternakan terbengkalai. Di sisi lain, hubungan Otis dan Daisy mulai semakin dekat.

Masalah makin besar ketika Dag menemui Otis dan memanfaatkan rasa bersalahnya. Dag memaksa kesepakatan agar kawanan koyote bebas mencuri hewan ternak secara berkala. Merasa gagal sebagai pemimpin, Otis sempat ingin meninggalkan peternakan. Namun ia berubah pikiran saat tahu para koyote menculik ayam- ayam, termasuk Etta dan anaknya, Maddy.

Didorong nasihat Miles, Otis berangkat sendirian menghadapi Dag di markas rongsokan. Teman-temannya lalu datang membantu dan pertarungan besar pun terjadi. Mereka berhasil mengalahkan para koyote dan pulang sebagai pahlawan. Sesampainya di rumah, Daisy melahirkan anak sapi yang diberi nama Ben. Otis pun berjanji menjaga peternakan seperti ayahnya dulu.