Jacqueline Genevieve Fernandez lahir pada tanggal 11 Agustus 1985 di Manama, Bahrain, dan dibesarkan dalam keluarga multietnis. Ayahnya, Elroy Fernandez, adalah seorang Sri Lanka Burgher, sedangkan ibunya, Kim, adalah keturunan Malaysia dan Kanada. Kakeknya dari pihak ibu adalah orang Kanada dan buyutnya berasal dari Goa, India. Ayahnya, yang merupakan seorang musisi di Sri Lanka, pindah ke Bahrain pada tahun 1980-an untuk menghindari kerusuhan antara suku Sinhala dan Tamil, dan kemudian bertemu dengan ibunya yang bekerja sebagai pramugari. Jacqueline adalah anak bungsu dari empat bersaudara, memiliki satu kakak perempuan dan dua kakak laki-laki. Setelah menyelesaikan pendidikan awalnya di Bahrain di Sacred Heart School, ia belajar komunikasi massa di University of Sydney, Australia. Setelah lulus, ia tampil dalam beberapa acara televisi di Sri Lanka. Ia juga menghadiri sekolah bahasa Berlitz, di mana ia belajar bahasa Spanyol dan meningkatkan kemampuannya dalam bahasa Prancis dan Arab. Menurut Jacqueline, ia bercita-cita menjadi seorang aktris sejak usia muda dan bermimpi menjadi bintang film Hollywood. Ia mendapatkan pelatihan di John School of Acting. Meskipun ia bekerja sebagai reporter televisi, ia menerima tawaran di industri modeling, yang datang sebagai hasil kesuksesannya dalam kontes kecantikan. Pada tahun 2006, ia dinobatkan sebagai pemenang kontes Miss Universe Sri Lanka dan mewakili Sri Lanka pada kontes Miss Universe 2006 yang diadakan di Los Angeles. Dalam sebuah wawancara pada tahun 2015, Jacqueline menggambarkan industri modeling sebagai "tempat pelatihan yang baik" dan mengatakan: "Ini adalah medium yang melibatkan melepaskan hambatan, mengenal tubuh Anda, dan percaya diri". Pada tahun 2006, ia tampil dalam video musik untuk lagu "O Sathi" oleh Bathiya and Santhush dan penyanyi perempuan muda Umaria Sinhawansa.

Pada tahun 2009, Jacqueline pergi ke India untuk tugas modeling. Ia berhasil melewati audisi untuk film fantasi Aladin (2009) karya Sujoy Ghosh, yang menjadi debut aktingnya. Ia memerankan kekasih dari karakter yang diperankan oleh Riteish Deshmukh, sebuah peran yang didasarkan pada karakter Putri Jasmine. Rajeev Masand dari CNN-IBN berpendapat bahwa ia "menyenangkan untuk dilihat dan tampil percaya diri, tetapi memiliki sedikit peran yang berarti". Meskipun film ini gagal secara kritis dan komersial, ia memenangkan penghargaan IIFA Award for Star Debut of the Year - Female.

Pada tahun 2010, Jacqueline tampil bersama Deshmukh dalam film komedi romantis fiksi ilmiah Jaane Kahan Se Aayi Hai. Ia berperan sebagai seorang gadis dari Venus yang mendarat di Bumi untuk mencari cinta. Film ini, bersama dengan penampilan Jacqueline, mendapat ulasan buruk. Namun, pada tahun 2011, ia mendapatkan peran terobosan dalam film thriller psikologis Murder 2, yang menjadi kesuksesan komersial pertamanya. Peran glamor dalam film ensemble komedi Housefull 2 (2012) dan film thriller aksi Race 2 (2013) juga mengukuhkan posisinya sebagai aktris yang sukses. Jacqueline kemudian membintangi film aksi terlaris Kick (2014) dan Vikrant Rona (2022), serta film komedi Housefull 3 (2016) dan Judwaa 2 (2017).

Selain karir aktingnya, Jacqueline juga menjadi juri dalam musim kesembilan acara realitas tari Jhalak Dikhhla Jaa (2016-2017), menjadi duta selebriti populer untuk berbagai merek dan produk, berpartisipasi dalam pertunjukan panggung, dan aktif dalam pekerjaan kemanusiaan.