LADY AND THE TRAMP menghadirkan kisah klasik penuh kehangatan dengan deretan pengisi suara seperti Barbara Luddy sebagai Lady, Larry Roberts sebagai Tramp, Peggy Lee sebagai Darling, Bill Thompson sebagai Jock, dan Bill Baucom sebagai Trusty.

Berlatar tahun 1909 di sebuah kota kecil, film ini mengikuti kehidupan Lady, seekor anjing cocker spaniel yang tumbuh manja di tengah keluarga Jim Dear dan Darling. Hidupnya terasa sempurna sampai kehadiran seorang bayi membuat Lady merasa tersisih dan bingung dengan perubahan sikap majikannya.

Di sisi lain kota, ada Tramp, anjing jalanan cerdas yang hidup bebas tanpa tuan dan sering merepotkan petugas penangkap anjing. Takdir mempertemukan Lady dan Tramp ketika Lady mulai cemas dengan masa depannya.

Tramp, yang mengaku berpengalaman, memperingatkan bahwa kehadiran bayi sering membuat anjing terlupakan. Meski awalnya membuat Lady resah, ketakutan itu sirna saat ia akhirnya diizinkan dekat dengan sang bayi.

Masalah baru muncul ketika Jim Dear dan Darling pergi, meninggalkan Lady bersama Tante Sarah yang membenci anjing dan membawa dua kucing Siam yang licik. Lady dijebak, dimasukkan moncong, hingga kabur dan kembali bertemu Tramp.

Dari petualangan malam penuh tawa, makan spaghetti romantis, hingga konflik karena masa lalu Tramp, hubungan mereka diuji. Puncaknya, Lady dan Tramp harus membuktikan kesetiaan dan keberanian demi melindungi sang bayi, sekaligus menemukan arti keluarga dan cinta sejati.